экспресс-тест на антиген нового коронавируса Sars-Cov-2

Экспресс-тест (мазок) на антиген

Нового Коронавируса (SARS-Cov-2)

Инструкция по применению

ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОБНАРУЖЕНИЯ НОВОГО КОРОНАВИРУСА

ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С ОБРАЗЦАМИ ИЗ НОСОГЛОТКИ
ТОЛЬКО ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ In Vitro.

 

ПРЕДПОЛАГАЕМОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

Экспресс-тест (мазок) на антиген Нового Коронавируса (SARS-Cov-2) используется для качественного обнаружения in vitro антигена нового коронавируса, выделенного в мазке из носоглотки человека, используя экспресс иммунохроматографический метод. Идентификация основана на моноклональных антителах, специфичных к антигену нового коронавируса. Это предоставит лечащим врачам информацию для назначения соответствующих лекарств.

 

КРАТКОЕ ИСЛОЖЕНИЕ

Новый коронавирус относится к роду β. COVID-19 представляет собой острое респираторное инфекционное заболевание. Люди обычно предрасположены к заболеванию. В настоящее время основным источником заражения являются пациенты, инфицированные новым коронавирусом. Бессимптомные инфицированные люди также могут быть источником инфекции. По данным текущего эпидемиологического исследования, инкубационный период составляет от 1 до 14 дней, в основном от 3 до 7 дней. К наиболее распространённым симптомам относятся жар, утомляемость и сухой кашель. В некоторых случаях обнаруживаются заложенность носа, насморк, боль в горле, боль в мышцах и диарея. Тяжелый острый респираторный синдром-коронавирус-2 (SARS-CoV-2) представляет собой оболочечный, несегментированный РНК-содержащий вирус положительной полярности. Поэтому распространенное среди людей заболевание Коронавирус-0 (COVID-19) заразно. SARS-CoV-2 имеет несколько структурных белков: шип(S), оболочки(E), мембраны(M) и нуклеокапсид(N).

В настоящее время существует множество вариантов нового коронавируса (SARS-CoV-2), и мутация N501Y и ее приблизительные варианты привлекли внимание, потому что они локализованы в спайковом гликопротеине, что изменяет эффективность защиты от заражения вирусом. Анализ in silico показал, что мутация N501Y не изменяет первичную и третичную белковые структуры домена РБД шиповидного белка. Следовательно, его антигенность остается неизменной.

ПРИНЦИП ПРОЦЕДУРЫ

Кассета для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-Cov-2) представляет собой иммунохроматографический мембранный анализ, в котором используются высокочувствительные моноклональные антитела к новому коронавирусу.

Тест-полоска состоит из следующих трех частей, а именно, прокладки для образца, прокладки для реагента и реакционной мембраны. Мембрана реагента содержит коллоидное золото, конъюгированное с моноклональными антителами против нового коронавируса. Реакционная мембрана содержит вторичные антитела к новому коронавирусу и поликлональные антитела против мышиного глобулина, которые предварительно иммобилизованы на мембране.

Когда образец тестируется, конъюгированный раствор из прокладки с реагентом растворяется и мигрирует вместе с образцом из носа. Если в образце присутствует коронавирус, комплекс, обнаруженный между конъюгатом против нового коронавируса и вирусом, будет улавливаться
/обнаруживаться специфическим моноклональным анти-новым коронавирусом, нанесенным на
Т-область.

Независимо от того, содержит ли образец вирус или нет, раствор продолжает мигрировать, встречая другой реагент (антитело против IgG мыши), который связывает оставшиеся конъюгаты, образуя красную линию в области C.

Кассета для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-Cov-2) может обнаруживать как нуклеопротеин SARS-Cov-2, так и спайковый белок SARS-Cov-2. С помощью иммуноферментного анализа мы определили, что используемое нами антитело связывается с аминокислотами 511-531 спайкового белка SARS Cov-2.

Выявляемость генетических вариантов SARS-CoV-2 была проверена путем изучения чувствительности к рекомбинантным белкам-шипам SARS-Cov-2 (от 319 до 541aa).

В этих тестах экспресс-тест на антиген нового коронавируса (SARS-Cov-2) достиг тех же значений при обнаружении вариантов B.1.1.7 (Великобритания) и B.1.351(ЮА), что и при обнаружении стандартного варианта.

 

РЕАГЕНТЫ

Мембрана реагента содержит коллоидное золото, конъюгированное с моноклональными антителами против нового коронавируса. Реакционная мембрана содержит вторичные антитела к новому коронавирусу и поликлональные антитела против мышиного глобулина, которые

предварительно иммобилизованы на мембране.

 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

 

•         Только для диагностики in vitro

•         Не используйте после истечения срока годности.  

•         Перед открытием убедитесь, что пакет из фольги, содержащий тестовое устройство, не поврежден.

•         Выполните тест при комнатной температуре от 15° C до 30 ° C.

•         Надевайте перчатки, избегайте прикосновения к мембране реагента и окну для образца.

•         Все образцы и использованные аксессуары следует рассматривать как инфицированные и утилизировать в соответствии с местными правилами.

•         Избегайте использования образцов, содержащих кровь.

 

 

 

 

 

ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ

 

Храните кассету для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-CoV-2) при комнатной температуре или в холодильнике (2°C–30°C). Не замораживать. Все реагенты стабильны до истечения срока годности, указанного на упаковке и буферном флаконе.

 

ВЗЯТИЕ И ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ

1. ВЗЯТИЕ ОБРАЗЦОВ*:

Применяется для диагностики нового коронавируса по образцам мазка из носоглотки. Используются свежесобранные образцы  для оптимального выполнения теста.   сбор образцов или неправильное обращение с образцами могут дать ложноотрицательный результат.

Полностью вставьте стерилизованный тампон, входящий в этот набор, в носовую раковину и прокатайте несколько раз для сбора эпидермальных клеток слизи.

* Так как существует множество брендов и производителей UTM и VTM, VTM и UTM от разных производителей по-разному влияют на чувствительность и специфичность продукта. Поэтому используйте только что собранные образцы для получения более точных результатов.

2. Подготовка образцов

1) Достаньте 1 флакон буфера для экстракции образцов, откройте крышку пробирки, добавьте весь буфер для экстракции в пробирку для экстракции.

2) Вставьте тампон в пробирку для экстракции, содержащую буфер для экстракции образцов. Вращайте тампон внутри пробирки круговыми движениями так, чтобы жидкость стекала и реабсорбировала из тампона, удалите тампон. Извлеченный раствор будет использоваться

в качестве тестового образца.

 

МАТЕРИАЛЫ

Предоставленные материалы

·         Тестовое истройство

·         Инструкция по применению

·         Стерильный тампон

·         Насадка

·         Пробирка для экстракции

·         Буфер для экстракции

 

Необходимые материалы, не входящие в пакет

·         Таймер

 

 

 

 

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Подождите, пока тест, образец и буфер для экстракции уравновесятся до комнатной температуры (15-30 ° C).

Перед тестированием.

1. Полностью вставьте стерилизованный тампон, входящий в этот набор, в носовую раковину и сделайте несколько мазков для сбора эпидермальных клеток слизи.

2. Отвинтите всю крышку пробирки для сбора образцов, выньте 1 флакон буфера для экстракции образцов, снимите крышку флакона, добавьте весь буфер для экстракции в пробирку для экстракции.

3. Поместите стерилизованный образец тампона в буфер для экстракции образцов. Поверните тампон примерно 10 секунд, прижимая головку к внутренней части пробирки, чтобы высвободить антиген из тампона.

4. Удалите стерилизованный тампон, прижимая головку стерилизованного тампона к внутренней части буфера, чтобы как можно больше жидкости стекала из тампона. Выбросьте стерилизованный тампон в соответствии с вашим протоколом утилизации биологически опасных отходов.

5. Навинтите и закрутите колпачок на пробирку для сбора образцов, затем энергично встряхните пробирку для сбора образцов, чтобы смешать образец и буфер для экстракции образцов.
См. Иллюстрацию 4.

 

Когда образец будет готов, выполните следующие процедуры для завершения теста:

1. Извлеките тестовое устройство из запечатанного пакета из фольги и используйте его как можно скорее. Наилучшие результаты будут получены, если анализ будет проведен сразу после открытия пакета из фольги. Положите тестовое устройство на чистую ровную поверхность.

2. Перенесите 3 капли образца в лунку для образцов тестового устройства вертикально, запустите таймер, прочитайте результат через 10-20 минут. Не интерпретируйте результат после 20 минут. 

 

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

(См. Иллюстрацию выше)

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ: Появляются две красные линии. Одна красная линия появляется в контрольной зоне (C) и одна красная линия в тестовой зоне (T). Оттенок цвета может быть разным, но его следует считать положительным, если есть даже слабая линия.

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ: В контрольной зоне (C) появляется только одна красная линия, а в тестовой зоне (T)-нет. Отрицательный результат указывает на то, что в образце нет частиц нового коронавируса или количество вирусных частиц ниже обнаруживаемого диапазона.

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ: В контрольной зоне не появляется красная линия (C). Тест недействителен, даже если на тестовой зоне (T) есть линия. Недостаточный объем пробы или неправильные рабочие процедуры являются наиболее вероятными причинами утраты тест-системой своей эффективности. Просмотрите процедуру тестирования и повторите тест, используя новое тестовое устройство. Если проблема не исчезнет, немедленно прекратите использование тестового набора и обратитесь за помощью к поставщику.

 

ОГРАНИЧЕНИЯ

• Кассета для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-CoV-2) представляет собой скрининговый тест острой фазы для качественного обнаружения. Собранный образец может содержать концентрацию антигена ниже предела чувствительности реагента, поэтому отрицательный результат теста не исключает заражения новым коронавирусом.

• Кассета для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-CoV-2) обнаруживает жизнеспособный и нежизнеспособный антиген нового коронавируса. Эффективность теста зависит от антигенной нагрузки в образце и может не коррелировать с культурой клеток, проведенной на том же образце. Положительный тест не исключает возможности присутствия других патогенов, поэтому результаты необходимо сравнить со всей другой доступной клинической и лабораторной информацией, чтобы поставить точный диагноз.

• Отрицательный результат теста может быть получен, если уровень экстрагированного антигена в образце ниже установленного для теста предела обнаруживания или если получен образец плохого качества.

• Не установлены результаты теста для мониторинга противовирусного лечения нового коронавируса.

• Положительный результат не исключает наличия сопутствующих инфекций, вызванных другими патогенами.

• Отрицательные результаты тестов не предназначены для исключения других вирусных или бактериальных инфекций, не связанных с SARS-CoV-2.

• Дети, как правило, выделяют вирус в течение более длительных периодов времени, чем взрослые, что может привести к различиям в чувствительности взрослых и детей.

• Отрицательный результат теста может быть получен в том случае, если уровень антигена в образце ниже установленного для теста предела обнаружения либо если сбор или транспортировка образца осуществлялись с нарушениями. Результат теста не исключает возможности заражения SARS-Cov-2 и должен быть подтвержден ПЦР.

 

ХАРАКТЕРИСТИКИ ВЫПОЛНЕНИЯ

КЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА

Клиническая оценка была проведена для сравнения результатов, полученных с помощью кассеты для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-Cov-2) и ПЦР. Результаты были обобщены ниже:

Таблица: Кассета для экспресс-теста на антиген нового коронавируса (SARS-Cov-2) в сравнение с

ПЦР

Метод		Набор для тестирования нуклеиновых кислот 2019-nCoV (ОТ-ПЦР)		Общие результаты
Кассета для экспресс-теста  на антиген  нового коронавируса  (SARS-Cov-2)	Результаты	Положительный	Отрицательый
	Положительный	201	0	201
	Отрицательый	8	450	458
Общие результаты		209	450	659

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Клиническая чувствительность= 201/209=96.17 % (95%CI* 92.51% to 98.17%)

Клиническая специфичность = 450/450＞99.9% (95%CI* 98.98% to 100%)

Достоверность: (201+450)/ (201+0+8+450) *100%=98.79% (95%CI* 97.58% to 99.43%)

*Доверительный интервал